میکروبیولوژی پزشکی، ایمونولوژی و ویروس شناسی. کلامیدیا - توصیف کلی کلامیدیا پروکاریوت ها

کلامیدیا (کلامیدیا) -- باکتری کوکال گرم منفی کوچک، به اندازه 250-1500 نانومتر (0.25-1 میکرون). آنها تمام ویژگی های اصلی باکتری ها را دارند: حاوی دو نوع اسید نوکلئیک (DNA و RNA)، ریبوزوم، اسید مورامیک (جزئی از دیواره سلولی باکتری های گرم منفی)، با شکافت دوتایی تکثیر می شوند و به برخی از آنتی بیوتیک ها حساس هستند. .

در سال 1966، در نهمین کنگره بین المللی میکروبیولوژیست ها، کلامیدیا از دسته ویروس ها حذف شد.

طبقه بندی

همه کلامیدیاها به ترتیب گروه بندی می شوند کلامیدیاسه، جنس کلامیدیا، دومی شامل چهار نوع است:

1. کلامیدیا تراکوماتیس (کلامیدیا تراکوماتیس).
2. کلامیدیا پسیتاسی.
3. کلامیدیا پنومونی.
4. کلامیدیا پکورم.

• کلامیدیا پسیتاسی- باعث پنومونی آتیپیک، آنسفالومیوکاردیت، آرتریت، پیلونفریت در انسان می شود.
• کلامیدیا پکورماخیرا شرح داده شده، جدا شده از گوسفند، گاو. شباهت دارد کلامیدیا پسیتاسی. نقش در پاتوژنز بیماری های انسانی ناشناخته است.
• کلامیدیا پنومونیهباعث عفونت حاد تنفسی و یک نوع خفیف پنومونی در بزرگسالان می شود.
• چشم انداز کلامیدیا تراکوماتیستنها در انسان یافت می شود، 18 نوع آنتی ژن (سروتیپ) در آن شناسایی شده است.
  سروتیپ های A، B، C از عوامل ایجاد کننده تراخم هستند. ناقلین حشرات هستند، مسیر اصلی عفونت ورود یک عامل عفونی با مالش به ناحیه غشای مخاطی چشم است. اسکارهای ایجاد شده در نتیجه توسعه فرآیند عفونی منجر به از دست دادن بینایی می شود. سروتیپ های L1-L3 در بافت لنفوئیدی تکثیر می شوند و عامل بیماری مقاربتی استوایی لنفوگرانولوما ونروم هستند. در مورد سروتیپ های D تا K، عفونت از طریق تماس جنسی رخ می دهد، بسیار کمتر از طریق مالش، نوزاد در هنگام زایمان از مادر آلوده آلوده می شود.

فیزیولوژی و پاتوژنز

چرخه زندگی کلامیدیا به طور قابل توجهی با چرخه زندگی باکتری ها متفاوت است.

کلامیدیا به دو شکل وجود دارد که از نظر خصوصیات مورفولوژیکی و بیولوژیکی متفاوت است. شکل خارج سلولی بسیار عفونی، هاگ مانند، جسم ابتدایی (ET) و شکل رویشی، زایشی و درون سلولی، جسم مشبک (RT) است.

ET شکل کره ای به قطر 0.15-0.2 میکرون دارد. RT دارای ساختار باکتری های گرم منفی معمولی با اندازه حدود 1 میکرومتر است (شکل 1 را ببینید). EB ها حاوی پیوندهای دی سولفید بیشتری هستند که به آنها اجازه می دهد در برابر فشار اسمزی مقاومت کنند.

اولین مرحله از فرآیند عفونی، جذب ET بر روی غشای پلاسمایی یک سلول میزبان حساس است. نقش مهمی در این مرحله توسط نیروهای الکترواستاتیک ایفا می شود. معرفی کلامیدیا توسط اندوسیتوز رخ می دهد. هجوم ناحیه پلاسمالما با ET جذب شده به داخل سیتوپلاسم با تشکیل یک واکوئل فاگوسیتیک رخ می دهد. این مرحله 7-10 ساعت طول می کشد. پس از آن، در حال حاضر در سلول، در عرض 6-8 ساعت، ET دوباره به شکل رویشی سازماندهی می شود - یک بدن شبکه ای که قادر به رشد و تقسیم است. در این مرحله است که دوره استفاده از داروهای ضد باکتری موثر است، زیرا ET به آنها حساس نیست.

تولید مثل کلامیدیا منجر به تشکیل آخالهایی می شود که به عنوان اجسام پرواچک شناخته می شوند. در عرض 18-24 ساعت پس از رشد، آنها در وزیکول سیتوپلاسمی تشکیل شده از غشای سلول میزبان موضعی می شوند. یک گنجایش ممکن است شامل 100 تا 500 کلامیدیا باشد. توقف فرآیند در این مرحله منجر به تداوم عفونت کلامیدیا می شود. سپس فرآیند بلوغ اجسام مشبک از طریق اجسام انتقالی (واسطه) طی 36-42 ساعت رشد در نسل بعدی ET آغاز می شود. چرخه کامل تولیدمثل کلامیدیا 72-48 ساعت است و با تخریب سلول آسیب دیده به پایان می رسد، در صورت ایجاد شرایط متابولیکی نامطلوب برای کلامیدیا، می توان این فرآیند را برای مدت طولانی تری به تعویق انداخت.

کلامیدیا می تواند از طریق لبه باریک سیتوپلاسم از سلول آلوده آزاد شود. در این مورد، سلول می تواند زنده بماند، این می تواند سیر بدون علامت عفونت کلامیدیا را توضیح دهد.

واکنش محافظتی در مرحله اولیه عفونت توسط لنفوسیت های پلی مورفونکلئر انجام می شود. فعال سازی پلی کلونال لنفوسیت های B نقش مهمی در محافظت از بدن دارد. در سرم خون و مایعات ترشحی در کلامیدیا، مقدار قابل توجهی ایمونوگلوبولین های IgG، IgM، IgA یافت می شود. با این حال، نقش اصلی در محافظت در برابر عفونت کلامیدیا توسط T-helpers اشغال شده است که فعالیت فاگوسیتیک ماکروفاژها را فعال می کند.

فراساختار

استفاده از روش های آنالیز فراساختاری امکان اثبات امکان ماندگاری کلامیدیا در سلول های اپیتلیال و فیبروبلاست های غشاهای مخاطی آلوده را فراهم کرد. کلامیدیا توسط مونوسیت های محیطی جذب شده و در بدن پخش می شود، مونوسیت ها در بافت ها مستقر می شوند و به ماکروفاژهای بافتی (در مفاصل، در عروق، در ناحیه قلب) تبدیل می شوند. ماکروفاژهای بافتی می توانند برای چندین ماه زنده بمانند، در حالی که یک محرک آنتی ژنی قوی هستند که منجر به تشکیل گرانولوم های فیبری در بافت سالم می شود. کلامیدیا یا قطعات آن می تواند از سلول ها آزاد شود و باعث تشکیل آنتی بادی های خاص شود، صرف نظر از اینکه آنتی ژن کلامیدیا در محل عفونت تشخیص داده شود.

ساختار دیواره سلولی کلامیدیا با اصل کلی ساخت باکتری های گرم منفی مطابقت دارد (شکل 2). از یک سیتوپلاسمی داخلی و یک غشای بیرونی تشکیل شده است (هر دو دوتایی هستند و به دیواره سلولی استحکام می دهند). خواص آنتی ژنی کلامیدیا توسط غشای داخلی تعیین می شود که توسط لیپوپلی ساکاریدها نشان داده می شود. به اصطلاح پروتئین های غشای بیرونی (OMP) در آن ادغام می شوند. پروتئین غشای خارجی اصلی (MOMP) 60 درصد از کل پروتئین را تشکیل می دهد. ساختار آنتی ژنی باقی مانده توسط پروتئین های غشای خارجی نوع دوم - OMP-2 نشان داده شده است.

آنتی ژن ها

همه کلامیدیاها دارای یک گروه مشترک هستند، آنتی ژن اختصاصی جنس (کمپلکس لیپوپلی ساکارید که نیمه فعال آن اسید 2-کتو-3-دئوکسیوکتانوئیک است) که در تشخیص بیماری با روش های ایمونوفلورسانس با آنتی بادی های خاص استفاده می شود.

پروتئین های MOMP و OMP-2 حاوی اپی توپ های اختصاصی گونه و سروتیپ هستند. با این حال، آنها همچنین حاوی مناطقی با شباهت زیاد در بین گونه ها (اپی توپ های خاص جنس) هستند که منجر به احتمال واکنش های متقابل می شود. پروتئین غشای سلولی پایه و سایر پروتئین های غنی از سیستئین توسط پیوندهای دی سولفیدی به هم مرتبط هستند. پنج ژن از ایزومرازهای مرتبط با دی سولفید پیدا شده است که ممکن است در بازسازی پروتئین‌های غنی از سیستئین در طی تمایز اجسام ابتدایی به آن‌های مشبک نقش داشته باشند. در Chl. تراخوماتیس 9 ژن کد کننده پروتئین های غشای سطحی شناسایی شده است کلامیدیا صنئومونی–18.

میز 1.آنتی ژن های کلامیدیا (طبق گفته Mardh P.، 1990)

ژنتیک

در سال 1998، استفنز و. al. تعیین توالی ژنومی را اعلام کرد کلامیدیا تراکوماتیس. ژنوم کلامیدیا کوچک است و بیش از 15 درصد از ژنوم E. coli را تشکیل نمی دهد. این کروموزوم شامل یک کروموزوم حاوی 1042519 جفت باز (58.7٪) و یک پلاسمید حاوی 7493 جفت باز است.

تجزیه و تحلیل ژنوم امکان جداسازی 894 ژن کد کننده پروتئین های مختلف را فراهم کرد. شباهت با پروتئین های قبلاً مطالعه شده سایر باکتری ها، تعیین هدف عملکردی 604 (68٪) پروتئین های کدگذاری شده را ممکن کرد. 35 (4%) پروتئین مشابه پروتئین های موجود در سایر باکتری ها بود. در 255 پروتئین (28٪) باقی مانده، توالی ها مشابه آنهایی که قبلا مورد مطالعه قرار گرفته بودند، نبودند. تجزیه و تحلیل توالی پروتئین نشان داد که 256 (29٪) پروتئین کلامیدیا در 58 خانواده در ژنوم، مشابه گروه بندی پروتئین ها در باکتری های ژنومی کوچک مانند مایکوپلاسماها و هموفیلوس آنفولانزا.

خانواده Chlamydiaceaeبخش Gracilicutes شامل یک جنس کلامیدیا است (از یونانی chlamydos، شنل؛ نام به دلیل شباهت سلول مشبک با غشای اطراف EBs در حال بلوغ در آن ایجاد شده است). در حال حاضر، این جنس شامل سه گونه است: C. trachomatis، C. psittaci و C. pneumoniae.

همه انواع کلامیدیابرای انسان و بسیاری از حیوانات بیماری زا است. بیماری هایی که آنها ایجاد می کنند در سراسر جهان گزارش شده و به عنوان شناخته شده است کلامیدیا.

کلامیدیانسبت به دماهای بالا حساس هستند (در دمای 60 اینچ در 10 دقیقه می میرند)، اما برای مدت طولانی در دماهای پایین باقی می مانند.

کلامیدیاتولید مثل توسط شکافت دوتایی چرخه زندگی کلامیدیاشامل تشکیل دو فرم اصلی است (شکل 23-1).

بدن ابتدایی کلامیدیا(ET) - ساختار خارج سلولی کروی کوچک (0.2-0.5 میکرون) با دیواره سلولی سه لایه. از نظر متابولیک غیر فعال و سازگار با بقای خارج سلولی. اجسام ابتدایی کلامیدیا- واحدهای عفونی که سلول ها را آلوده می کنند. به گفته Romanovsky-Giemsa، ET رنگ بنفش را نشان می دهد.

بدن مشبک کلامیدیا(RT) - فرم داخل سلولی تولید مثل. با یک سازند بزرگتر (تا 1 میکرون) نشان داده می شود که دارای ساختار مشبک با دیواره سلولی نازک است. در عرض 5-6 ساعت از ET که به داخل سیتوپلاسم نفوذ کرده و تغییرات ساختاری یافته است، ایجاد می شود. در ابتدا، یک بدن اولیه (شکل رویشی) از ET تشکیل می شود که طبق رومانوفسکی-گیمسا آبی رنگ می شود. سپس بدنه اولیه به RT تبدیل می شود.

پس از تشکیل RT سلول کلامیدیاشروع به تقسیم دوتایی می کند و اجسام انکلوزیون را به شکل واکوئل در سیتوپلاسم سلول آلوده تشکیل می دهد. اجسام شامل کلامیدیامعمولاً در نزدیکی هسته قرار دارد و طبق رومانوفسکی-گیمسا به رنگ بنفش درآمده است. آنها را می توان با میکروسکوپ نوری تشخیص داد. در بدنه اجزاء RT شکاف پذیر وجود دارد. C. psittaci و C. pneumoniae اجسام انکلوزیون کوچک زیادی را در اطراف هسته تشکیل می دهند. C. trachomatis یک بدن بزرگ را تشکیل می دهد. در نتیجه تراکم PT، یک جسم میانی شبیه به چشم گاو نر تشکیل می شود.

اجسام میانی کلامیدیابه EB های آماده برای خروج از سلول تبدیل می شوند. انتشار ET با مرگ سلول آلوده همراه است.

با توجه به ویژگی های آنها، کلامیدیا یک موقعیت مستقل (ویژه) در میان سایر میکروارگانیسم ها - پروکاریوت ها را اشغال می کند. برای انسان، عمدتا نمایندگان دو جنس، کلامیدیا و کلامیدوفیلا، اهمیت دارند. سه نوع از بیشترین اهمیت برخوردار است.

کلامیدیا تراخوماتیس ، که سروتیپ های مختلف باعث می شوند تراخم، لنفوگرانولومای مقاربتی و رایج ترین کلامیدیا دستگاه ادراری تناسلی

کلامیدوفیلا psittaciعلل اورنیتوز و کلامیدیا مشترک بین انسان و دام

کلامیدوفیلا پنومونیهباعث پنومونی آنتروپونوز، عفونت های حاد تنفسی، ایجاد برخی از اشکال آسم برونش، تصلب شرایین با این پاتوژن همراه است.

ویژگی های مورفولوژیکی.

چرخه سلولی رشد کلامیدیا دارای دو شکل اصلی است - بدن های ابتدایی (ET) - شکل عفونی و اجسام مشبک (RT) - شکل رویشی. EBهای کروی بسیار کوچکتر هستند (قطر کمتر از 300 نانومتر)، ساختار الکترونی سفت تری دارند، از نظر متابولیکی غیرفعال هستند و با وجود کوتاه مدت خارج سلولی سازگار هستند.

چرخه رشد کلامیدیا در داخل سیتوپلاسمی انجام می شود - فاگوزوم(واکوئل)، جایی که EB ها با تحریک اندوسیتوز وارد می شوند. آنتی ژن های سطحی پروتئین موثر حساس به حرارت کلامیدیا در فرآیند جذب و اندوسیتوز شرکت می کنند. ET ها همجوشی فاگوزومولیزوزومی را سرکوب می کنند و با مشارکت پروتئین سطح اصلی به RT ها تبدیل می شوند که متابولیسم فعال، اندازه های بزرگتر و شکافت دوتایی فعال دارند. چرخه تولیدمثل با انتقال معکوس RT به ET، پارگی غشا و غشای محدود کننده سلول میزبان، آزاد شدن ET از سلول ها، سپس ET سلول های جدید را آلوده می کند، به پایان می رسد. بدنه های شمولبا استفاده از میکروسکوپ نوری و ایمونولومینسانس در سلول ها شناسایی می شوند.

علاوه بر این، کلامیدیاها قادر به ایجاد اشکال L-، اشکال پایدار هستند.

اموال فرهنگی.

کلامیدیا روی محیط‌های غذایی با پیچیده‌ترین ترکیب رشد نمی‌کند (این باعث می‌شود که از نظر خواص مشابه ریکتزیا و به‌ویژه ویروس‌ها باشند)، حیوانات آزمایشگاهی و جنین‌های مرغ (زیست‌سنجی) و به‌ویژه رده‌های سلولی حیوانات حساس را می‌توان برای کشت آنها استفاده کرد - بیشتر اوقات. سلول های مک کوی (اغلب با درمان با سیتواستاتیک برای افزایش حساسیت)، که "استاندارد طلایی" تشخیص در نظر گرفته می شدند.

خواص بیوشیمیایی.

ساختار آنتی ژنیک.

1. برجسته کنید آنتی ژن سطحی جنس خاص(LPS)، روی غشای خارجی دیواره سلولی موضعی شده است. LPS دارای دو عامل تعیین کننده آنتی ژنی است، یکی از آنها برای کل جنس اختصاصی است، دیگری با برخی از باکتری های گرم منفی دیگر (سالمونلا سرووار مینه سوتا) واکنش متقابل دارد و حرارت پایدار است.

2. MOMR - پروتئین اصلی غشای خارجیبه عنوان یک پروتئین ساختاری عمل می کند و پورینا. شامل عوامل تعیین کننده پروتئین حرارت پذیر با گونه، نوع و ویژگی سرووار می باشد.

عوامل تعیین کننده بیماری زایی.

1. اندوتوکسین (لیپوپلی ساکارید)، مشابه اندوتوکسین های باکتری های گرم منفی.

2. اگزوتوکسین ها مواد حساس به حرارت هستند.

3. آنتی ژن های سطح سلولی که واکنش های دفاعی را سرکوب می کنند.

عوامل بیماریزایی کلامیدیا از همجوشی فاگوزومو-لیزوزومی در فاگوسیت ها جلوگیری می کند.

شرح مختصری از توزیع.

کلامیدیا ادراری تناسلیشایع ترین اشکال کلامیدیا هستند. در کشورهای بزرگ (ایالات متحده آمریکا، روسیه) سالانه چندین میلیون مورد ثبت می شود، در جهان - از 50 تا 90 میلیون مورد. کمبود تظاهرات اولیه و عواقب شدید کلامیدیا ادراری تناسلی، به ویژه در زنان (اختلالات تولید مثل، عوارض عفونی)، نیازهای ویژه ای را برای تشخیص به موقع آزمایشگاهی ایجاد می کند. سرووارهای کلامیدیا D - K کلامیدیا تراخوماتیسکه باعث کلامیدیا ادراری تناسلی می شود از طریق جنسی از فردی به فرد دیگر منتقل می شود. حمل بدون علامت حداقل در 5 درصد از مردان و 10 درصد از زنان مشاهده می شود. سروتیپ های فردی این پاتوژن باعث ایجاد بیماری های شایع در گذشته می شود تراخم(همراه با ضایعات ملتحمه و بافت های مجاور چشم که اغلب منجر به آب مروارید و کوری می شود) و لنفوگرانولومای مقاربتی (به طور عمده در کشورهای توسعه نیافته آسیا، آفریقا و آمریکای لاتین با آب و هوای گرم ثبت شده است).

اورنیتوز- عفونت کلامیدیا ناشی از C.psittaci. فرد از پرندگان آلوده می شود - میزبان اصلی این پاتوژن توسط گرد و غبار هوا و قطرات معلق در هوا. در شرایط شهری، کبوترها خطر اصلی هستند (از 20% تا 100% مبتلا به این عامل بیماری زا هستند، کودکان بیشتر با آنها تماس می گیرند. در خانه، قناری ها و به خصوص طوطی ها می توانند منشاء آن باشند (عامل شدیدترین شکل - پسیتاکوزیس) اورنیتوز اغلب به صورت پنومونی بینابینی شدید رخ می دهد، علاوه بر این، سروتیپ های این پاتوژن باعث ایجاد کلامیدیا مشترک بین انسان و دام(به عنوان مثال، به اصطلاح سقط ویروسی گوسفند، کلامیدیا در گاو، و غیره)، تماس با حیوانات بیمار می تواند اشکال مختلف کلامیدیا را در انسان ایجاد کند. ویژگی های بالینی و اپیدمیولوژیک کلامیدیا مشترک بین انسان و دام در انسان به اندازه کافی مورد مطالعه قرار نگرفته است.

برونکوپنومونیناشی از C.pneumoniae. اینها عفونت های آنتروپونوز هستند که از فردی به فرد دیگر منتقل می شوند، اکثر موارد تحت بالینی هستند. ضایعات دستگاه تنفسی فوقانی با توسعه بعدی برونکوپنومونی وجود دارد. اینها عفونت های رایجی هستند (آنتی بادی علیه C.pneumoniae تقریباً در نیمی از جمعیت بزرگسال شناسایی می شود)، اما هنوز به خوبی تشخیص داده نمی شوند. این پاتوژن با ایجاد اشکال خاصی از آسم برونش و آترواسکلروز همراه است.

با در نظر گرفتن تنوع تظاهرات بالینی و نیاز به افتراق انواع بالینی کلامیدیا (عمدتاً تناسلی و خارج تناسلی)، تشخیص آزمایشگاهی از اهمیت ویژه ای برخوردار است.

1. طبقه بندی: ابر پادشاهی Procaryota، پادشاهی باکتری ها، بخش Scotobacteria، کلاس باکتری ها، راسته Chlamydiales، ج. Chlamydiaceae، s. کلامیدیا، ج. C. trachomatis (1 بیووار - تراخم، 2 بیووار - لنفوگرانولوم مقروض، 3 بیووار - uro - و کلامیدیا خارج تناسلی)، C. psitacci (اورنیتوز)، C. pneumoniae.

2. مورفولوژی: Gr-، کوکسی های کوچک، آکاپسولار، بدون تاژک، بی حرکت. آنها به دو شکل ارائه می شوند: اجسام ابتدایی به شکل کروی (خارج از شخص) و اجسام مشبک (داخل سلولی).

4. خواص بیولوژیکی:

الف) روی محیط های غذایی مصنوعی تولید مثل نکنید

ب) در کیسه زرده جنین مرغ و در کشت سلولی کشت می شود

5. ساختار AG: لیپوگلیکوپروتئین خاص گروه، AG خاص گونه.

6. عوامل بیماری زایی و بیماری زایی:

الف) اورنیتوز:

چسبندگی بر روی گیرنده های سلول های اپیتلیال برونش ها، برونشیول ها، لنفوسیت ها ← نفوذ و تولیدمثل در سلول ها ← تخریب سلول ها ← نفوذ به سلول های دست نخورده → باکتریمی → رانش به اندام های پارانشیمی.

ب) تراخم و لنفوگرانولوم مقاربتی، کلامیدیا ادراری تناسلی:

با تراخم و کلامیدیا ادراری تناسلی: تماس با غشای مخاطی اندام های ادراری تناسلی، راست روده، ملتحمه چشم ← تولید مثل و تجمع در سلول های اپیتلیال ← آزادسازی سموم ← فرآیندهای التهابی موضعی (اورتریت، ورم ملتحمه، ← انتشار مخاطی غشایی) ← آسیب به اندام های تناسلی ادراری.

با لنفوگرانولومای مقاربتی 1) التهاب در ناحیه دروازه بیان نمی شود 2) گسترش MB لنفوژن است 3) عمدتاً l. y در عین حال، کلامیدیا و سموم آنها می توانند به خون نفوذ کنند و باعث بازسازی آلرژیک بدن بدون ایجاد کانون های هماتوژن ثانویه در سایر اندام ها شوند.

7. تظاهرات بالینی:

الف) اورنیتوز: پدیده مسمومیت عمومی، آسیب ریه و تمایل به دوره طولانی با تشدید.

ب) تراخم: آسیب قرنیه و ملتحمه با تشکیل فولیکول ها (دانه های تراخوماتوز)، در اواخر مرحله - اسکار ملتحمه و غضروف پلک ها.

ج) لنفوگرانولومای مقعدی: آسیب عمدتاً به فرج، پرینه و رکتوم

8. مصونیت: GMO، KIO، HRT. ایمنی پس از عفونت کوتاه مدت و ناپایدار است. مواردی از بیماری های مکرر و عفونت مجدد مشاهده می شود.

9. اپیدمیولوژی.

الف) اورنیتوز: منشأ آن پرندگان است. OPP - آئروسل.

ب) تراخم: منبع - بیماران با اشکال فعال و پاک شده، با عود بیماری و همچنین ناقلین. OPV - از طریق دست، لباس، حوله و غیره.

ج) لنفوگرانولوم مقاربتی، کلامیدیا ادراری تناسلی: منشأ آن فرد بیمار یا ناقل است، OPV - جنسی، گاهی اوقات تماسی با خانواده.

10. پیشگیری: واکسیناسیون انجام نمی شود.

11. درمان: گروه AB تتراسایکلین، اریترومایسین و ریفامپیسین.

12. تشخیص:

1. روش تحقیق باکتریوسکوپی: تشخیص کلامیدیا، ساختار مورفولوژیکی و آنتی ژن آنها در سلول های آسیب دیده (مواد بالینی).

مواد برای مطالعه: آماده سازی خراش دادن از غشاهای مخاطی دستگاه ادراری تناسلی (مجرای ادرار، دهانه رحم و غیره) و سایر اندام ها (ملتحمه، رکتوم و غیره) برای بررسی در اشکال خارج تناسلی موجود است.

اسمیر به گفته رومانوفسکی-گیمسا. اجزای سیتوپلاسمی کلامیدیا (جسم هالبرستدتر پروواچک) حاوی اجسام مشبک بزرگ یا اجسام ابتدایی کوچک هستند. از نظر رنگ و ساختار داخلی، RT و ET با هسته سلول و سیتوپلاسم متفاوت است.

این روش با حساسیت نسبتا کم مشخص می شود. استفاده از آنتی بادی های پلی کلونال و مونوکلونال شب تاب برای تشخیص کلامیدیا AG در اجزای سیتوپلاسمی در آماده سازی خراش دادن دستگاه ادراری تناسلی به طور قابل توجهی حساسیت و ویژگی روش را افزایش می دهد. هر دو روش ایمونوفلورسانس مستقیم و غیر مستقیم استفاده می شود. با میکروسکوپ فلورسنت، آنتی ژن های کلامیدیا در برابر پس زمینه قرمز یا نارنجی سیتوپلاسم سلول های اپیتلیال به شکل آخال های درون سلولی سبز روشن شناسایی می شوند. از نظر محتوای اطلاعاتی و حساسیت، تنها از روش باکتریولوژیک پایین‌تر است.

هنگام تشخیص اورنیتوز و سایر کلامیدیاهای مشترک بین انسان و دام، از روش باکتریوسکوپی استفاده نمی شود.

2. روش تحقیق باکتریولوژیک: جداسازی کلامیدیا از مواد عفونی با عفونت جنین مرغ، حیوانات آزمایشگاهی یا کشت سلولی و به دنبال آن نشان دادن پاتوژن.

مواد برای تحقیق: - مانند باکتریوسکوپی. با اورنیتوز - خون یا خلط. خون از ورید (نه کمتر از 5 میلی لیتر) در 7-10 روز اول بیماری، خلط - تا روز 14 بیماری بررسی می شود. برای حذف میکرو فلور همراه، آنتی بیوتیک هایی اضافه می شود که روی کلامیدیا اثر نمی کنند (استرپتومایسین، نیستاتین، جنتامایسین). هنگامی که یک جنین مرغ آلوده می شود، ماده آزمایشی به کیسه زرده یک جنین 6-7 روزه در حال رشد تزریق می شود. نشان دادن کلامیدیا پس از 48 تا 72 ساعت بر اساس تشخیص آخال های سیتوپلاسمی معمولی حاوی اجسام ابتدایی و شبکه ای (اسمیر چاپ از کیسه های زرده جنین مرغ و (یا) ارزیابی سلول های آلوده - رنگ آمیزی ماکیاولو، RIF مستقیم و غیر مستقیم انجام می شود. ).

هنگام تشخیص اورنیتوز، علاوه بر کشت سلولی، ممکن است حیوانات پیبراتور (به داخل مغز یا داخل صفاقی) نیز آلوده شوند.

3. روش سرولوژیکی تحقیق: در سرم خون که 2-3 بار با فاصله 14-10 روز بررسی می شود آنتی بادی و اسرار اندام تناسلی تشخیص داده می شود. برای تشخیص از RSK، RPGA، RIF، ELISA استفاده می شود. در کلامیدیا ادراری تناسلی، تیترهای 1:32-1:64 از نظر تشخیصی در RIF قابل توجه است. قابل اطمینان ترین افزایش تیتر آنتی بادی چهار بار یا بیشتر است.

4. روش تحقیق آلرژی: تنظیم تست های آلرژیک پوستی. در تشخیص اورنیتوز با آلرژن اورنیتوز استفاده می شود. تست داخل جلدی از همان روزهای اول بیماری در اکثر بیماران مثبت می شود و تا یک سال یا بیشتر باقی می ماند.

میز 1.

کلامیدیا (خانواده Chlamydiaceae)

موقعیت طبقه بندی کلامیدیا درست است کلامیدیا، خانواده کلامیداسه، نوع کلامیدیا. سه نوع کلامیدیا وجود دارد - با.تراخوماتیس، با.psittaci، با.پنومونیه، - ایجاد بیماری در انسان، حیوانات و همچنین چندین گونه که فقط برای حیوانات بیماریزا هستند (به عنوان مثال، , S. resogit، S.آبورتوس, سی. فلیسو غیره.). طبقه بندی کلامیدیا بیماری زا برای انسان در جدول ارائه شده است. یکی

طبق آخرین طبقه بندی، خانواده کلامیداسهپیشنهاد شده است که به دو جنس تقسیم شود: جنس کلامیدیا، که توسط گونه نشان داده می شود با.تراخوماتیس، و جنس کلامیدوفیلا، که شامل گونه ها می شود با.psittaciو با.پنومونیه.

مراحل اصلی چرخه زندگی کلامیدیا:

1) بدن های ابتدایی - ساختارهای کروی کوچک (0.2-0.5 میکرومتر) با الکترون متراکم با یک نوکلوئید فشرده و یک دیواره سلولی سه لایه سفت و سخت.

2) اجسام اولیه (اولیه) یا مشبک- تشکیلات کروی بزرگ (0.8-1.5 میکرون) دارای ساختار مشبک با دیواره سلولی نازک و یک نوکلوئید فیبریلار.

3) بدن های میانی- مرحله میانی بین اجسام ابتدایی و شبکه ای.

بدن های ابتداییعفونی و مشبک هستند - شکل رویشی کلامیدیا. اشکال رویشی با شکافت دوتایی درون سلولی تکثیر می شوند، اما وقتی از سلول میزبان آزاد می شوند، عفونی نیستند. چرخه زندگی کلامیدیا با این واقعیت شروع می شود که اجسام ابتدایی توسط سلول میزبان فاگوسیتوز می شوند و سپس در عرض چند ساعت دوباره سازماندهی می شوند، اندازه آنها افزایش می یابد و به اشکال مشبکی تبدیل می شوند که با تقسیم عرضی تکثیر می شوند. اشکال دختر حاصل نیز با شکافت دوتایی تکثیر می شوند. چرخه زندگی زمانی به پایان می رسد که اشکال میانی در حال ظهور دوباره سازماندهی شوند (فشرده شوند)، اندازه آنها کاهش یابد و به بدن های ابتدایی تبدیل شوند. کلامیدیا در داخل وزیکول‌های سیتوپلاسمی تولید مثل می‌کند و میکروکلونی‌هایی را تشکیل می‌دهد که توسط غشایی احاطه شده‌اند که از هجوم غشای سلولی در طی فاگوسیتوز بدن ابتدایی ناشی می‌شود. هر 3 مرحله رشد کلامیدیا در ترکیب میکروکلونی ها یافت می شود. در یک سلول می تواند چندین میکروکلونی وجود داشته باشد که در صورت فاگوسیتوز چندین جسم ابتدایی تشکیل می شوند. پس از پارگی دیواره وزیکول و غشای سلول میزبان، کلامیدیاهای تازه تشکیل شده آزاد می شوند و اجسام ابتدایی که سلول های دیگر را آلوده می کنند، چرخه رشد را تکرار می کنند. برای تشخیص میکروسکوپی کلامیدیا در سلول‌های آلوده (بافت‌ها)، از روش‌های رنگ‌آمیزی مختلفی استفاده می‌شود: Romanovsky-Giemsa، Castenada، Machiavello و غیره. هنگامی که طبق Romanovsky-Giemsa رنگ‌آمیزی می‌شوند، آبی یا بنفش می‌شوند. با این حال، کلامیدیا در حالت بدون رنگ نیز در هنگام میکروسکوپ آماده سازی مرطوب زیر شیشه با استفاده از یک سیستم نوری کنتراست فاز به وضوح قابل مشاهده است. در شرایط بهینه رشد در سلول های یوکاریوتی، چرخه زندگی کلامیدیا 17-40 ساعت است.کلامیدیا در کیسه زرده جنین مرغ در دمای 33 تا 41 درجه سانتی گراد (بسته به گونه) و همچنین در کشت سلولی به خوبی تکثیر می شود. از مهره داران مختلف محتوای G+C در DNA کلامیدیا از 39 تا 45 مول متغیر است، نسبت RNA/DNA در اجسام ابتدایی 2 برابر کمتر از اجسام مشبک است. C. trachomatis دارای دو ویژگی متابولیک مهم است: توانایی سنتز گلیکوژن و پیش سازهای اسید فولیک که بر اساس آن (با در نظر گرفتن سایر صفات) به راحتی از سایر گونه ها C. psittaci و C. pneumoniae متمایز می شوند (جدول 2).

علائم افتراقی سه نوع کلامیدیا

جدول 2

خواص مورفولوژیکی و رنگی. کلامیدیا باکتری های گرم منفی کوچکی هستند که شکل کروی یا بیضی دارند. آنها هاگ تشکیل نمی دهند، تاژک و کپسول ندارند.

ساختار دیواره سلولی کلامیدیا با سایر باکتری ها متفاوت است: این یک غشای دو لایه است که فضای پری پلاسمیک را محدود می کند، حاوی N-استیل مورامیک اسید، جزء اصلی پپتیدوگلیکان نیست (یا حاوی مقدار کمی است). سفتی دیواره سلولی توسط پپتیدهایی که توسط پل های پپتیدی به هم متصل می شوند، ایجاد می شود. در غیر این صورت، کلامیدیا شبیه سایر باکتری های گرم منفی است. آنها گلیکولیپیدهایی مشابه LPS غشای خارجی دیواره سلولی باکتری های گرم منفی دارند و در رنگ آمیزی گرم قرمز می شوند. روش اصلی برای تشخیص کلامیدیا لکه رومانوفسکی-گیمسا است.

کلامیدیا چندشکلی است که با ویژگی های تولید مثل آنها همراه است. چرخه رشد منحصر به فرد کلامیدیا با تناوب دو شکل مختلف وجود مشخص می شود - ابتدایی و شبکه ای بدن (یا اولیه).

بدن های ابتداییذرات عفونی کوچک (اندازه 0.2-0.3 میکرون) متابولیک غیرفعال هستند که در خارج از سلول قرار دارند. آنها دارای یک پوسته ضخیم متشکل از غشاهای داخلی و خارجی هستند که مقاومت نسبتاً بالایی آنها را در برابر شرایط نامطلوب محیطی تعیین می کند. اجسام ابتدایی طبق رومانوفسکی-گیمسا به رنگ قرمز رنگ می شوند. در داخل سلول ها، سلول های ابتدایی به اجسام مشبک تبدیل می شوند.

اجسام مشبکشکل رویشی کلامیدیا هستند، معمولاً شکل تخم مرغی دارند و چندین برابر اجسام ابتدایی بزرگتر هستند (اندازه آنها 0.4 + 0.6x0.8-5-1.2 میکرون است). آنها به صورت داخل سلولی در نزدیکی هسته قرار دارند و طبق رومانوفسکی - گیمسا به رنگ آبی یا بنفش رنگ آمیزی می شوند. عفونت اجسام مشبک در مقایسه با ابتدایی بسیار کم است.

در داخل سلول ها، اجسام ابتدایی به اجسام مشبک تبدیل می شوند، که به نوبه خود بارها توسط شکافت دوتایی تقسیم می شوند، سپس متراکم می شوند و به اجسام ابتدایی تبدیل می شوند. در پایان چرخه، دومی بیشتر سلول میزبان را اشغال می کند. با کشش دیواره واکوئل، آن را می شکنند و سپس غشای پلاسمایی سلول را می شکنند. چرخه رشد کلامیدیا 24-48 ساعت طول می کشد و با مرگ سلول میزبان و آزاد شدن اجسام اولیه به پایان می رسد. دومی که آزاد می شود، سلول های دست نخورده همسایه را آلوده می کند و چرخه تکرار می شود.

کلامیدیا در کیسه زرده جنین های مرغ در حال رشد، ارگانیسم های حیوانات حساس و در کشت های سلولی مانند HeLa، McCoy، Hep-2 کشت می شود. دمای مطلوب کشت +35 درجه سانتی گراد است. قبل از عفونت، کشت های سلولی تحت تابش قرار می گیرند یا با سیکلوهگزامید درمان می شوند، که به کلامیدیا اجازه می دهد ATP را راحت تر جذب کند. C. trachomatis، عامل ایجاد کننده لنفوگرانولومای مقاربتی، با حدت بالاتر مشخص می شود و بنابراین کشت آن در تمام مدل های زنده پیشنهادی آسان تر است، حتی بدون نیاز به آماده سازی اولیه کشت های سلولی.

فعالیت آنزیمیکلامیدیا دارای مجموعه کوچکی از آنزیم ها است. آنها می توانند اسید پیروویک را تخمیر کنند، برخی از لیپیدها را سنتز کنند، و غیره. اما کلامیدیا قادر به سنتز ترکیبات پرانرژی نیست و در خارج از سلول میزبان عملکرد متابولیک آنها به حداقل می رسد. تامین متابولیت های کلامیدیا عمدتاً به دلیل فعالیت حیاتی سلول های میزبان انجام می شود. علاوه بر این، برخی از متابولیت ها (به عنوان مثال، ایزولوسین) می توانند بازدارنده رشد کلامیدیا باشند و احتمالاً، بنابراین، یک دوره نهفته کلامیدیا را فراهم می کنند.

ساختار آنتی ژنیک

کلامیدیا دارای سه نوع آنتی ژن است:

♦ لیپوپلی ساکارید مقاوم در برابر حرارت (گلیکولیپید) خاص جنس واقع در دیواره سلولی کلامیدیا. با کمک RSK شناسایی می شود.

♦ آنتی ژن اختصاصی گونه با طبیعت پروتئینی که به صورت سطحی تر - در غشای خارجی قرار دارد. تشخیص با استفاده از RIF.

♦ آنتی ژن اختصاصی نوع پروتئینی.

علاوه بر این، C. trachomatis و C. psittaci دارای آنتی ژن های نوع خاص هستند که احتمالاً پپتیدهای غشایی هستند. طبقه بندی کلامیدیا به انواع سرولوژیکی، بر اساس ساختار آنتی ژنی آنها، در جدول ارائه شده است. 2

عوامل بیماری زاییپروتئین های غشای خارجی کلامیدیا با خاصیت چسبندگی آنها مرتبط است. این چسب ها فقط در اجسام ابتدایی یافت می شوند. علاوه بر این، کلامیدیا اندوتوکسین (LPS) تولید می کند. ممکن است برخی از آنها یک اگزوتوکسین ترشح کنند که اثر کشنده ای دارد: هنگامی که به صورت داخل وریدی تجویز می شود، باعث مرگ موش می شود. ظاهراً پروتئین های غشای خارجی یک عامل ضد فاگوسیتیک هستند، زیرا آنها قادر به سرکوب ادغام فاگوزوم با لیزوزوم هستند.

علاوه بر این، برخی از کلامیدیا دارای پروتئین شوک حرارتی (HSP) هستند که می تواند باعث واکنش های خود ایمنی شود.

مقاومت. مقاومت کلامیدیا در برابر عوامل مختلف محیطی بسیار زیاد است. آنها در برابر دماهای پایین مقاوم هستند (حتی وقتی در دمای -50 ... - 70 درجه سانتیگراد منجمد می شوند فعالیت خود را از دست نمی دهند)، خشک می شوند. بنابراین، به عنوان مثال، عامل ایجاد کننده اورنیتوز می تواند تا چند ماه در محیط خارجی (مثلاً در بستر لانه پرنده) باقی بماند. با این حال، مانند همه باکتری‌های غیر اسپورساز، کلامیدیا کاملاً به گرما حساس است و به سرعت توسط مواد ضدعفونی‌کننده مختلف غیرفعال می‌شود.

اپیدمیولوژی، پاتوژنز، کلینیک.بیماری های ناشی از کلامیدیا را کلامیدیا می نامند. کلامیدیاهای آنتروپونوز و زئوآنتروپونوز وجود دارد. بیماری های ایجاد شده با.تراخوماتیسو با.پنومونیه، آنتروپونوز هستند. اورنیتوز که عامل ایجاد آن می باشد با.psittaci، یک عفونت زئوآنتروپونتیک است. اورنیتوز از فردی به فرد دیگر منتقل نمی شود. S. resogit، S.آبورتوس, سی. فلیس و انواع دیگر کلامیدیا فقط حیوانات را مبتلا می کند.

کلامیدیا و دارای اپیتلیوتروپیسم هستند و بنابراین قادرند اپیتلیوم اندام های مختلف را تحت تاثیر قرار دهند. تولید مثل انبوه کلامیدیا در سلول های اپیتلیال منجر به تخریب لایه اپیتلیوم و ایجاد زخم هایی می شود که با تشکیل اسکار و چسبندگی بهبود می یابند. تغییرات سیکاتری در قرنیه در تراخم منجر به نابینایی می شود، التهاب اندام های لگنی در کلامیدیا ادراری تناسلی منجر به ناباروری می شود.

پس از مرگ تعداد زیادی از سلول های اپیتلیال، پاتوژن می تواند وارد خون، اندام های پارانشیمی شود و در بافت لنفاوی ثابت شود. این، به ویژه، برای لنفوگرانولوماتوز و اورنیتوز مقاربتی است. علاوه بر این، بسیاری از انواع کلامیدیا قادر به وجود نهفته یا تداوم در ارگانیسم میزبان هستند و باعث بازسازی ایمنی و آلرژیک بدن می شوند، به عنوان مثال، در سندرم رایتر.